[Nguyên tắc phát hiện]

Sản phẩm này là hệ thống xét nghiệm Taqman RT-qPCR dựa trên đầu dò huỳnh quang đa năng. Đầu dò huỳnh quang Taqman là một oligonucleotide cụ thể dựa trên cơ chế phóng viên-dập tắt. Đối với mỗi đầu dò, đầu 5'được gắn nhãn fluorophore, trong khi đầu 3'được dán nhãn bằng chất làm nguội. Khi đầu dò còn nguyên vẹn, chất huỳnh quang phát ra từ fluorophore sẽ bị chất dập tắt hấp thụ và không có tín hiệu huỳnh quang nào được phát hiện. Tuy nhiên, trong quá trình khuếch đại khuôn mẫu, đầu dò sẽ bị suy giảm do hoạt tính exonuclease 5'-3 'của Taq DNA polymerase, và chất phóng xạ huỳnh quang và chất dập tắt bị phân cắt và tách biệt, khi đó tín hiệu huỳnh quang có thể được phát hiện. Sự tạo ra mỗi amplicon phân tử đi kèm với sự tạo ra tín hiệu huỳnh quang. Giám sát thời gian thực của toàn bộ quá trình PCR có thể được đánh giá bằng cách theo dõi sự tích tụ của các tín hiệu huỳnh quang.

[Dụng cụ]

Lưu ý: cần bù màu cho Roche lightcycler480